کلونینگ و بیان موقت ژن محافظت کننده سلولی، ho-۱ ، در سلول های بنیادی مزانشیمال از طریق سیستم بیانی آدنوویروس بر مبنای تکنولوژی gateway

Authors

پژمان حامدی اصل

p. hamedi asl مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران راحله حلبیان

r. halabian دانشگاه تربیت مدرس ـ تهران ـ ایرانسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) محمد محمدزاده

m. mohammadzadeh مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university) مهشید محمدی پور

m. mohammadipour مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایرانسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) زهرا بخشنده

abstract

چکید ه   سابقه و هدف   ho-1 (هِم اکسیژناز-1) یکی از عوامل قدرتمند محافظت کننده سلولی می باشد. هدف از این مطالعه، کلونینگ و بیان موقت ژن ho-1 انسانی در سلول های بنیادی مزانشیمال( msc ها) با استفاده از سیستم بیانی آدنوویروسی برمبنای تکنولوژی gateway بود.   مواد و روش ها   در یک مطالعه تجربی، به منظور القای ho-1 ، رده سلولی 549 a به مدت 1 ساعت با اشعه uv مواجه گردید. cdna توتال ho-1 جداسازی شد و از طریق واکنش کلونینگ topo به وکتور pentr topo/d کلون گردید. برای ایجاد کلون بیانی، واکنش نوترکیبی lr بین کلون اولیه و وکتور مقصد( pad/cmv/v5-dest ) به انجام رسید. ویروس نوترکیب در رده سلولی یوکاریوتی مناسب تشکیل شد. msc ها به وسیله ویروس نوترکیب بیان کننده ho-1 آلوده سازی شدند.   یافته ها   نتایج نشان داد که ho-1 انسانی نوترکیب با موفقیت کلون شده و صحت و قرار گرفتن ژن در قالب صحیح درون وکتور به وسیله تعیین توالی dna تایید شد. بیان ho-1 در msc ها به وسیله آنالیز rt-pcr و وسترن بلات تایید گردید. این نتایج حاکی از این بود که بیان ho-1 موقت است.   نتیجه گیری   بیان موقت ژن ho-1 انسانی در msc ها با استفاده از سیستم بیانی آدنوویروسی، ممکن است یک استراتژی انتقال ژنی کارآمد در راستای ارتقای سلول درمانی فراهم نماید.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کلونینگ و بیان موقت ژن محافظت‌کننده سلولی، HO-1 ، در سلول‌های بنیادی مزانشیمال از طریق سیستم بیانی آدنوویروس بر مبنای تکنولوژی Gateway

    چکید ه   سابقه و هدف   HO-1 (هِم‌اکسیژناز-1) یکی از عوامل قدرتمند محافظت کننده سلولی می‌باشد. هدف از این مطالعه، کلونینگ و بیان موقت ژن HO-1 انسانی در سلول‌های بنیادی مزانشیمال( MSC ها) با استفاده از سیستم بیانی آدنوویروسی برمبنای تکنولوژی Gateway بود.   مواد و روش‌ها   در یک مطالعه تجربی، به منظور القای HO-1 ، رده سلولی 549 A به مدت 1 ساعت با اشعه UV مواجه گردید. cDNA توتال HO-1 جداسازی شد ...

full text

کلونینگ و افزایش بیان موقت ژن nrf۲ در سلول های بنیادی مزانشیمی به واسطه سیستم بیانی آدنوویروسی بر مبنای فناوری gateway

زمینه: افزایش بقای سلول های بنیادی مزانشیمی پس از پیوند، کارایی این سلول ها را در درمان افزایش می دهد. به همین دلیل، دست کاری سلول های بنیادی مزانشیمی با ژن های محافظت کننده سلولی همانند nf-e2 related factor-2 (nrf2) جهت بهبود کارایی سلول درمانی مهم است. هدف این مطالعه، کلونینگ و افزایش بیان موقت ژن nrf2 در سلول های بنیادی مزانشیمی توسط سیستم بیانی آدنوویروسی می باشد. روش ها: ژن nrf2 از سلول ها...

full text

دست‌ورزی سلول‌های بنیادی مزانشیمی با استفاده از سیستم بیانی آدنو ویروس حاوی ژن حفاظت‌کننده سلولی NRF2

  چکید ه   سابقه و هدف   مهم‌ترین مساله در پیوند سلول‌های بنیادی مزانشیمی( MSC )، بقای پایین پس از پیوند می‌باشد. دست‌ورزی ژنتیکی آن‌ها، یک استراتژی در جهت حفاظت سلولی علیه آسیب‌های محیطی است. حفظ خاصیت تمایزی این سلول‌ها پس از دست‌کاری، مهم می‌باشد. در این مطالعه توانایی تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی پس از دست‌ورزی با NRF2 بررسی شد.   مواد و روش‌ها   در یک مطالعه تجربی، سلول‌های بنیادی مزانشی...

full text

کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفاb2ی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی

زمینه و هدف: اینترفرون‌ها وسیلة دفاعی بدن علیه ویروس‌ها هستند که به سرعت در بدن تولید شده، سلول­های اطراف را به تولید پروتئین‌هایی که تکثیر ویروس را مهار، یا پاسخ ایمنی و رشد سلولی را کنترل می‌کنند، تحریک می‌کنند. با ‌توجه به اهمیت دارویی اینترفرون آلفا b2 انسانی در ایران و جهان، تولید این دارو در داخل کشور و از طریق بیوشیمیایی امکان‌پذیر اما بسیار مشکل می‌باشد. زیرا تولید این ...

full text

جداسازی، همسانه‌سازی و بیان فاکتور سلول بنیادی با استفاده از سیستم بیانی پروکاریوتی

چکیده سابقه و هدف فاکتور سلول بنیادی(SCF)، یک گلیکوپروتئین 28 تا 40 کیلودالتونی است که نقش مهمی را در تکثیر و تمایز سلول­های بنیادی خونساز(HSCs) بازی می­کند. هدف این مطالعه­ جداسازی، کلونینگ و بیان SCF در میزبان بیانیRosetta  بود. Rosetta علاوه بر ویژگی­های میزبان بیانی پروکاریوتی، انتظار می‌رفت با فراهم کردن کدون­های نادر پروتئین­های یوکاریوتی، سطح بیان پروتئین نوترکیب را افزایش دهد. مواد و ر...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه پژوهشی خون

جلد ۹، شماره ۳، صفحات ۲۱۴-۲۲۵

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023